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ATCC細胞關(guān)于無(wú)限細胞系一些應用限制解讀

發(fā)布時(shí)間: 2022-08-24  點(diǎn)擊次數: 499次
   ATCC細胞在收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進(jìn)行檢測的標本,儲存在4℃備用,如有特殊原因需要周期收集標本,將標本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存,避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時(shí),-20℃可保存1個(gè)月。-70℃可保存6個(gè)月。部分激素類(lèi)標本需添加抑肽酶。
  科研常用細胞直接從組織上分離的原代細胞和購買(mǎi)的細胞系,通常將從組織上分離獲得的一代到十代內的細胞統稱(chēng)為原代細胞,而大部分原代細胞會(huì )在此之后逐漸生長(cháng)停滯并衰老死亡,極少量能繼續存活至五十代以后的細胞遺傳信息發(fā)生了改變,成為無(wú)限細胞系或連續細胞系,一般的無(wú)限細胞系只具有永生性的特點(diǎn),還有一些細胞的接觸抑制消失,可以多層生長(cháng),甚至在異體接種后還有致瘤性。
  無(wú)限細胞系由于其永生和快速分裂的特點(diǎn)一直是細胞水平研究時(shí)的熱門(mén)選擇,由于方便培養、種類(lèi)繁多、生長(cháng)速度快且成本較低,可以快速開(kāi)展研究,使得各種無(wú)限細胞系被廣泛應用。然無(wú)限細胞系“渾身是寶”,但在應用上還是有一些限制:
  1.細胞的生物學(xué)特性改變
  在研究過(guò)程中由于需要大量的樣本,無(wú)限細胞系需要快速繁殖并擴大培養,而其在連續傳代培養過(guò)程中會(huì )發(fā)生一定突變,無(wú)限制地連續傳代可能導致細胞系的基因型和表型都發(fā)生改變,從而影響實(shí)驗結果。
  2.細胞系交叉污染
  這里說(shuō)的交叉污染是細胞系之間的交叉污染,就是做實(shí)驗用的細胞系內可能混進(jìn)了其他種類(lèi)的細胞。這可能是由于建立細胞系時(shí)導致的,也有可能是一些不當操作如同期多種細胞共養、耗材重復使用等,或者是由于一些細胞培養相關(guān)產(chǎn)品導致的,可能很不經(jīng)意的一個(gè)操作便導致了整個(gè)實(shí)驗的失敗。
  3.細胞應用
  很多細胞在體內體外培養中無(wú)法增殖,比如在使用神經(jīng)元、骨骼肌細胞、心肌細胞、周細胞以及終末分化的肝細胞等進(jìn)行實(shí)驗時(shí),每次都需要再次從新鮮的組織中分離原代細胞。

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